Década de 1970: Sistemas basados en gel
No existían métodos para leer el código genético, incluso en el más simple de los genomas, por lo que Fred fue un verdadero pionero.
Secuenciación de ADN comenzó en 1977 con el desarrollo del «Método de terminación en cadena». Esto fue desarrollado por Fred Sanger y su equipo» en el Laboratorio de Biología Molecular del Consejo de Investigación Médica en Cambridge, Reino Unido. Antes de esto, no existían métodos para leer el código genético, incluso en el más simple de los genomas, Así que Fred fue un verdadero pionero.
Fred Sanger basó su método de secuenciación de ADN, también conocido como el «Método Sanger», en el proceso natural de Replicación del ADN, donde se sintetizan nuevas hebras de ADN utilizando una hebra existente como plantilla. Durante la réplica muchos nuevos Radiactivo-se crean hebras de ADN marcadas y se utilizan Bases ‘Terminator’ Cada hebra se puede replicar en diferentes longitudes.
La electroforesis ayuda a separar los fragmentos de ADN según el tamaño.
El proceso también involucró una técnica llamada electroforesis, que todavía se usa ampliamente en la actualidad. Esta técnica ayuda a separar los fragmentos de ADN según el tamaño. Los fragmentos de ADN se cargan en un gel y luego se pasa una corriente eléctrica a través de él. Esto extrae el ADN a través del gel con pequeños fragmentos que se mueven más a lo largo del gel que los fragmentos más grandes. Una imagen de rayos X del gel, llamada autorradiograma, entonces se puede hacer para visualizar la secuencia de ADN.
Interpretación de los resultados
En los primeros días, los científicos tenían que leer la secuencia de letras de ADN a mano.
En los primeros días, los científicos tenían que leer la secuencia de Bases de ADN (A, C, G y T) del autoradiograma a mano. Cada base estaba en un carril separado y el autoradiograma se leía de abajo hacia arriba (base más baja primero a base más alta última). Luego, los datos se ingresaron manualmente en una computadora.
Como pueden imaginar, este fue un proceso largo. Se requirieron aproximadamente 12 horas para la electroforesis, otras 12 horas para desarrollar el autoradiograma y muchas horas para leer la secuencia.
La técnica que Fred desarrolló es la base de las tecnologías de secuenciación de ADN que todavía se utilizan hoy en día.
Sin embargo, esta técnica puso la pelota en marcha para las técnicas modernas de secuenciación de ADN y dio paso a muchos nuevos descubrimientos. Fred Sanger y su equipo» fueron los primeros científicos en secuenciar un genoma completo utilizando este método. Este genoma tenía poco más de 5.000 bases de largo y de un virus? llamado phiX174 que infecta gérmenes.
Después de este éxito, el equipo de Sanger «pasó a secuenciar otros genomas, incluido el ADN de humanos». mitocondria (las centrales energéticas de nuestras células). La técnica que Fred desarrolló es la base de las tecnologías de secuenciación de ADN que todavía se utilizan hoy en día y ha dado forma a la genómica, el estudio de los genomas.